结核分枝杆菌Rv0757基因的原核表达及其编码蛋白对巨噬细胞功能的影响

• 作者: 杨玉涛 谷冬晴 陈卫 鲍朗
• 来源期刊: 四川大学学报（医学版）
• 关键词: 结核分枝杆菌 Rv0757基因 PhoP蛋白 巨噬细胞功能
• 年，卷（期）: 2015,（3）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 359-362
• 语种: 中文

摘要

目的 构建结核杆菌Rv0757基因原核表达重组质粒pET28a-Rv0757,并研究表达的目标蛋白对小鼠骨髓巨噬细胞株ANA-1细胞的作用.方法 将扩增出的Rv0757基因重组到原核表达质粒pET28a(+),并通过SDS-PAGE和Western blot鉴定诱导表达的目的蛋白.纯化目标蛋白后将目标蛋白PhoP作用于小鼠ANA-1细胞,检测活细胞数、乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)、一氧化氮(NO)和细胞凋亡指标.结果 成功构建出pET28a-Rv0757原核表达质粒,诱导表达的目标蛋白经SDS-PAGE和Western blot鉴定分析,其相对分子质量约为32×10 3.目的蛋白作用于小鼠ANA-1细胞后对活细胞数和细胞上清LDH活力无明显影响,但可以明显抑制细胞释放NO和细胞凋亡.结论 本研究成功构建了原核表达载体pET28a-Rv0757,并成功表达出目标蛋白,该蛋白对小鼠ANA-1细胞没有毒性损伤,但可以抑制细胞释放NO和细胞的凋亡.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	鲍朗	四川大学华西基础医学与法医学院感染免疫研究室	84	212	7.0	10.0
2	陈卫	四川大学华西基础医学与法医学院感染免疫研究室	3	9	2.0	3.0
3	杨玉涛	四川大学华西基础医学与法医学院感染免疫研究室	1	2	1.0	1.0
4	谷冬晴	四川大学华西基础医学与法医学院感染免疫研究室	1	2	1.0	1.0