结核分枝杆菌Rv2389c基因的克隆和原核表达

• 作者: 李立文 李立青 苏明权 郝晓柯
• 来源期刊: 西南国防医药
• 学科: 医学
• 关键词: 结核分枝杆菌 促进复活因子 克隆 表达
• 年，卷（期）: 2006,（1）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 25-27
• 页数: 3页
• 分类号: R378.9
• 字数: 3181字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1004-0188.2006.01.009

摘要

目的:克隆并原核表达结核分枝杆菌Rv2389c基因.方法:培养结核分枝杆菌,提取其基因组,PCR扩增出485bp的Rv2389c基因,克隆入pSP73载体,测序分析.将该目的基因亚克隆入pGEX-4T-2表达载体,测序证实正确后转化大肠杆菌BL21(DE3),待大肠杆菌增菌至A600nm值为0.6时,用0.3 mmol/LIPTG在30℃诱导表达重组蛋白.结果:测序结果证实获得了Rv2389c基因,其序列与GenBank中报道完全一致.构建了重组表达质粒,表达的蛋白以12%SDS-PAGE分析,在Mr约42KD处出现一条新生蛋白带,经凝胶薄层扫描检测,表达量约占菌体蛋白的26.8%.结论:成功克隆了结核分枝杆菌Rv2389c基因并得到了其大肠杆菌表达产物,为进一步研究其活性和功能奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	郝晓柯	第四军医大学西京医院检验科	322	1751	18.0	23.0
2	苏明权	第四军医大学西京医院检验科	226	1052	14.0	20.0
3	李立文	第四军医大学西京医院骨科研究所	30	110	5.0	7.0
4	李立青	第四军医大学西京医院检验科	3	8	2.0	2.0