Taq RecA蛋白的克隆表达及其在SNP基因分型中的应用

• 作者: 何晓辉 王进 秦正红 陈曹鑫
• 来源期刊: 苏州大学学报（医学版）
• 学科: 医学
• 关键词: RecA蛋白 单核苷酸多态性 等位基因特异性聚合酶链式反应
• 年，卷（期）: 2012,（2）
• 所属期刊栏目: 方法与技术
• 页码范围: 233-236
• 分类号: R392-33
• 语种: 中文

摘要

目的 研究克隆表达的Taq RecA蛋白作为一种添加剂在单核苷酸多态性(SNP)基因型分析中的作用.方法 构建pET-28a-Taq RecA表达质粒,在BL21(DE3)菌株中诱导表达,用热变性和饱和硫酸铵沉淀法去除部分杂蛋白,再经Ni-NTA亲和层析柱纯化分离Taq RecA蛋白；用PCR和等位基因特异性PCR (AS-PCR)方法研究其增强特异性和在SNP基因分型中提高分型准确性的作用.结果 成功构建了表达质粒,表达纯化得到较高纯度蛋白,用于SNP基因分型中减少了非特异性产物,提高了分型准确性.结论 Taq RecA蛋白作为一种PCR中的添加剂,在ATP辅助作用下,适量添加能提高AS-PCR介导的SNP基因分型的准确度.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	秦正红	苏州大学医学部药学院药理学系苏州衰老与神经疾病重点实验室	55	402	10.0	18.0
2	王进	苏州大学医学部药学院药理学系苏州衰老与神经疾病重点实验室	31	81	4.0	7.0
3	陈曹鑫	苏州大学医学部药学院药理学系苏州衰老与神经疾病重点实验室	2	2	1.0	1.0
4	何晓辉	苏州大学医学部药学院药理学系苏州衰老与神经疾病重点实验室	3	5	2.0	2.0