ARV、REV与ALV三重RT-PCR检测方法的建立

• 作者: 吕素芳 宋峰 杨慧 毕研丽 沈志强 王金良 苗立中 郭广君
• 来源期刊: 中国兽医学报
• 学科: 农学
• 关键词: 三重聚合酶链反应 禽呼肠孤病毒 禽网状内皮增生病病毒 禽白血病病毒
• 年，卷（期）: 2012,（3）
• 所属期刊栏目: 预防兽医学
• 页码范围: 341-344
• 分类号: S852.65
• 字数: 2523字
• 语种: 中文

摘要

根椐GenBank中已发表的禽呼肠孤病毒（ARV）、禽网状内皮增生病病毒（REV）、禽白血病病毒（ALV）等3种病毒基因组序列,设计了3对分别与ARV、REV和ALV某段基因序列互补的引物。在建立各病毒单项RT-PCR技术的基础上,优化三重RT-PCR反应条件,建立了3种病毒的三重RT-PCR技术。结果表明,用这3对引物对同一样品中的ARV、REV、ALV核酸模板进行三重RT-PCR扩增,可同时扩增ARV的247bp,ALV的675bp,REV的467bp的特异性片段,而对其他6种禽病病原的PCR扩增结果均为阴性。敏感性测定结果表明,该三重RT-PCR技术能检出10pg的ALV、1pg的ARV和10pg的REV模板。用42份临床病料对本研究多重RT-PCR技术和单项RT-PCR技术进行对比验证,结果显示,两者的总符合率为92%以上。表明建立的多重RT-PCR检测方法,具有特异、快速、准确的特点,可用于对这3种病毒的同时检测和鉴别诊断。