关中奶山羊Prm1基因的克隆及真核表达

• 作者: 仇普斌 刘超 华进联 吕晓 孙军伟 曹晖 朱海鲸 李明昭
• 来源期刊: 中国农业科学
• 学科: 农学
• 关键词: 关中奶山羊 Prm1基因 基因克隆 表达规律
• 年，卷（期）: 2012,（6）
• 所属期刊栏目: 畜牧·资源昆虫
• 页码范围: 1183-1190
• 分类号: S827
• 语种: 中文
• DOI: 10.3864/j.issn.0578-1752.2012.06.017

摘要

[目的]研究雄性奶山羊Prm1基因的表达规律并克隆该基因,为奶山羊精子发生过程的研究提供分子基础.[方法]利用PCR技术从关中奶山羊睾丸组织中扩增出Prm1基因的全CDS序列,对其进行同源性比较和进化比较.同时用PCR、western blotting及免疫组化技术检测Prm1在不同年龄雄性关中奶山羊睾丸中的表达.将克隆出的奶山羊Prm1基因与pIRES-GFP载体连接构建重组真核表达载体,转染GCl细胞和人的脐带基质细胞检测Prm1基因的超表达情况.[结果]Prm1基因在成年奶山羊睾丸组织中的表达量很高,且只定位于精子头部,在其它时期的睾丸组织中基本不表达.同时扩增得到了关中奶山羊Prm1基因CDS序列,与其它物种比对,发现其与许多物种具有较高的同源性,与牛的同源性高达97.4％,最后在GCl细胞和人的脐带基质细胞中进行了超表达.[结论]得到了关中奶山羊Prml基因的表达规律及完整的CDS序列.