鹅黄病毒囊膜蛋白的原核表达及抗原性分析

• 作者: 刘宇卓 张敬峰 李银 赵冬敏 钮慧敏 韩凯凯 黄欣梅
• 来源期刊: 华北农学报
• 学科: 农学
• 关键词: 禽黄病毒 E蛋白 原核表达 抗原性
• 年，卷（期）: 2012,（5）
• 页码范围: 33-37
• 页数: 5页
• 分类号: Q786|S855.3
• 字数: 4439字
• 语种: 中文

摘要

选取鹅黄病毒囊膜蛋白(E蛋白)基因进行克隆、表达和纯化,以获得能应用于血清学诊断和可作为亚单位疫苗的重组蛋白.根据鹅黄病毒JS804株全基因序列设计了1对引物,采用RT-PCR方法扩增出了鹅黄病毒的E基因,将其克隆到表达载体pET32a(+)中,构建了重组表达质粒pET32a-E,转化大肠杆菌BL21(DE3),并用IPTG进行诱导表达.结果表明,鹅黄病毒E基因在大肠杆菌中获得高效表达,融合蛋白分子量约为70 kDa,主要以包涵体形式存在于菌体中.Western Blot和间接免疫荧光试验发现,重组E蛋白具有较好的反应原性和良好的免疫原性.鹅黄病毒E蛋白的原核表达为进一步研究该蛋白功能、建立血清学检测方法及研制亚单位疫苗奠定了基础.