日本脑炎病毒囊膜蛋白的基因原核表达及抗原性分析

• 作者: 丁壮 刘雯 夏志平 张宁 张瑞岩 李丹 李勇 薛慧亮 金洪涛
• 来源期刊: 动物医学进展
• 学科: 农学
• 关键词: 日本脑炎病毒 E蛋白 原核表达 抗原性
• 年，卷（期）: 2010,（6）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 19-25
• 分类号: S852.659.6
• 字数: 5052字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1007-5038.2010.06.005

摘要

参照GenBank中的日本脑炎病毒序列设计一对特异性引物,采用RT-PCR法扩增E基因得到cDNA,克隆至pMD-18T载体,经测序证实后亚克隆至原核表达载体pET-28a中,转化入BL21(DE3),IPTG诱导表达,对表达产物进行SDS-PAGE电泳分析.结果表明,成功构建了重组质粒pET-28a/JEV E,目的蛋白主要以包涵体形式表达.Western blot检测表明,表达产物与兔抗JEV多克隆抗体呈阳性反应,在ELISA试验中,用表达出的E蛋白包被,能够很明显地区分出猪日本脑炎阴性、阳性血清.