脆性X智力低下蛋白在大肠杆菌中的表达及纯化

• 作者: 丁宁 崔芳芳 张嵘 李芳芳 邹检平 郭永
• 来源期刊: 中国计划生育学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 脆性X综合征 FMRP重组表达 蛋白纯化
• 年，卷（期）: 2012,（6）
• 所属期刊栏目: 技术与方法
• 页码范围: 410-414
• 分类号: R749.94
• 字数: 3678字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1004-8189.2012.06

摘要

目的:在大肠杆菌中对脆性X智力低下蛋白(FMRP)进行重组表达,获得高产量及高纯度的可溶性重组蛋白.方法:以人脑cDNA文库为模板,PCR扩增FMR1基因后将其克隆至融合表达载体pGEX - 6P -1中,重组载体转化进入大肠杆菌BL21(DE3) pLysS,并用IPTG进行诱导表达.应用谷胱甘肽-琼脂糖凝胶4B进行亲和层析纯化GST - FMRP融合蛋白,并以SDS - PAGE电泳和Western blot对融合蛋白的表达进行检测.结果:亲和纯化后的融合蛋白经FMRP及GST单抗分别进行Western blot鉴定为GST - FMRP融合蛋白.结论:大肠杆菌中FMRP ISO10的重组表达产量高,纯化得到可溶性重组蛋白,为FMRP抗体的制备及FXS检测试剂盒的开发奠定基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张嵘	沈阳药科大学生命科学与生物制药学院	23	35	4.0	4.0
2	崔芳芳		3	15	2.0	3.0
6	邹检平		6	13	3.0	3.0
7	郭永		7	19	3.0	4.0
8	丁宁		6	24	3.0	4.0
9	李芳芳		1	0	0.0	0.0