小鼠Nestin启动子的克隆及其表达载体的构建

• 作者: 张丽 朱孝荣 袁凤刚 袁红花
• 来源期刊: 实用医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 遗传载体 启动子 Nestin 调控 转染
• 年，卷（期）: 2012,（3）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 370-373
• 分类号: R346
• 字数: 2896字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1006-5725.2012.03.012

摘要

目的:克隆Nestin基因启动子序列,并研究其调控能力.方法:用高保真酶PCR扩增出小鼠Nestin启动子全序列、核心序列,pcDNA3.1质粒双酶切切掉CMV启动子序列,将Nestin基因启动子序列插入到原CMV启动子位置,pEGFP-N1质粒双酶切下EGFP序列,克隆入pcDNA3.1多克隆位点中,重组构建质粒,分别用Nestin启动子全序列和核心序列调控EGFP基因的表达.重组质粒分别转染Nestin+细胞和Nestin-细胞,观察EGFP基因在细胞内的表达情况.结果:成功克隆出Nestin基因启动子全序列和核心序列.经酶切鉴定及测序证实正确.二序列皆能调控EGFP在各种细胞内的表达.结论:Nestin基因启动子全序列和核心序列具有非特异性调控能力.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	袁凤刚	徐州医学院实验动物中心	10	75	4.0	8.0
2	袁红花	徐州医学院神经生物教研室	45	129	5.0	10.0
3	朱孝荣	徐州医学院实验动物中心	43	163	6.0	11.0
4	张丽	徐州医学院神经生物教研室	19	69	4.0	7.0