含人Apelin-R重组腺病毒载体pDC316-apelinR-EGFP的构建

• 作者: 张院 樊丽娅
• 来源期刊: 中华临床医师杂志（电子版）
• 学科: 医学
• 关键词: 腺病毒科 糖尿病 Apelin-R
• 年，卷（期）: 2012,（16）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 4626-4629
• 分类号: R511.8
• 字数: 3451字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3877/cma.j.issn.1674-0785.2012.16.019

摘要

目的 构建含有人Apelin受体(Apelin-R)基因的pDC316-apelinR-EGFP腺病毒穿梭载体,为糖尿病相关基因Apelin的体内研究提供新方法.方法 PCR方法分别扩增Apelin-R基因,测序正确后与载体pDC316-EGFP连接,构建重组腺病毒载体pDC316-apelinR-EGFP;脂质体法与腺病毒骨架载体共转染HEK293细胞进行重组腺病毒包装,稀释法测定腺病毒滴度.RT-PCR和Western blot方法检测Apelin-R的表达.结果 限制性核酸内切酶鉴定及测序结果均证明Apelin-R基因成功扩增并克隆到重组腺病毒载体pDC316-apelinR-EGFP.在HEK293中成功包装出含Apelin-R的腺病毒Ad-apelinR-EGFP,病毒滴度为3.1×109 TCID50/ml,感染Ad-apelinR-EGFP的HEK293E细胞中可检测到Apelin-R的mRNA和蛋白表达.结论 成功构建了真核表达载体pDC316-apelinR-EGFP,得到了表达绿色荧光蛋白的Apelin-R腺病毒,该病毒有望用于糖尿病的体内研究实验.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张院	西安市北方医院心血管内科	4	12	2.0	3.0
2	樊丽娅	西安交通大学医学院第一附属医院内分泌科	2	0	0.0	0.0