细胞因子信号转导抑制因子1RNA干扰慢病毒载体的构建与鉴定

• 作者: 万欢英 周敏 张秋蕊 程挺 钱嫣蓉
• 来源期刊: 中国组织工程研究
• 学科: 医学
• 关键词: 细胞因子信号转导抑制因子1 慢病毒载体 RNA干扰 A549 细胞 组织构建
• 年，卷（期）: 2012,（7）
• 所属期刊栏目: 技术与方法
• 页码范围: 1267-1270
• 分类号: R318
• 字数: 4389字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1673-8225.2012.07.030

摘要

背景:以往关于细胞因子信号转导抑制因子1 的研究多用脂质体或其他载体转染的技术,但存在效率低和安全性差等问题.目的:构建细胞因子信号转导抑制因子1 RNA 干扰慢病毒载体并进行鉴定.方法:实验设计3 组针对细胞因子信号转导抑制因子1 的短发夹RNA 序列,应用基因重组技术插入pPll3.7 载体,测序正确的重组病毒质粒与包装质粒通过共转染293T 细胞,培养48 h 后,收集细胞培养上清液,感染A549 细胞,western blot 检测目的蛋白细胞因子信号转导抑制因子1 在靶细胞中的表达.结果与结论:实验通过对重组载体进行测序分析证实短发夹RNA 插入慢病毒载体,慢病毒载体上清成功转染A549 细胞后western blot 检测结果显示该载体抑制了细胞因子信号转导抑制因子1 蛋白在A549 细胞有表达.说明实验成功构建了细胞因子信号转导抑制因子1 RNA 干扰慢病毒载体.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	周敏	上海交通大学医学院附属瑞金医院呼吸科	125	451	11.0	16.0
2	万欢英	上海交通大学医学院附属瑞金医院呼吸科	129	1051	18.0	29.0
3	钱嫣蓉	上海交通大学医学院附属瑞金医院呼吸科	4	15	2.0	3.0
4	程挺	上海交通大学医学院附属瑞金医院呼吸科	4	0	0.0	0.0
5	张秋蕊	上海交通大学医学院附属瑞金医院呼吸科	2	0	0.0	0.0