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摘要:
目的:构建细胞周期相关转录因子E2F-1 RNA干扰(RNAi)慢病毒表达载体.方法:选取E2F-1基因的19 nt特异性序列,设计针对E2F-1的shRNA序列,应用基因重组技术克隆到pLentiLox 3.7(pLL 3.7)慢病毒表达载体中,Xba I和 Not I进行双酶切和DNA测序鉴定重组克隆,在脂质体的介导下将慢病毒的混合包装载体质粒和包含E2F-1基因RNAi的重组慢病毒载体共转染293FT细胞,包装成病毒48 h后,收集病毒颗粒,孔稀释法测定病毒滴度.结果:双酶切证实shRNA正确插入慢病毒载体,DNA测序证实插入的序列正确;293FT细胞包装E2F-1基因RNAi的重组慢病毒载体成功;收集的细胞培养上清液中,病毒的滴度为5×107 TU/mL.结论:成功构建人E2F-1基因RNAi慢病毒载体,为研究E2F-1对于胃癌生长的影响提供了稳定的转染细胞载体.
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内容分析
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文献信息
篇名 转录因子E2F-1基因RNA干扰慢病毒载体的构建与鉴定
来源期刊 广西医科大学学报 学科 医学
关键词 慢病毒载体 E2F-1 RNAi
年,卷(期) 2010,(2) 所属期刊栏目 基础研究
研究方向 页码范围 165-168
页数 分类号 R735.2
字数 2957字 语种 中文
DOI 10.3969/j.issn.1005-930X.2010.02.001
五维指标
作者信息
序号 姓名 单位 发文数 被引次数 H指数 G指数
1 王晓通 广西医科大学第七附属医院神经外科 26 101 6.0 8.0
2 李雷 广西医科大学第七附属医院神经外科 27 95 6.0 7.0
3 钱倩 广西医科大学第七附属医院神经外科 6 30 4.0 5.0
4 谢玉波 广西医科大学第一附属医院麻醉科 154 576 10.0 13.0
5 肖强 广西医科大学第七附属医院神经外科 104 361 9.0 11.0
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研究主题发展历程
节点文献
慢病毒载体
E2F-1
RNAi
研究起点
研究来源
研究分支
研究去脉
引文网络交叉学科
相关学者/机构
期刊影响力
广西医科大学学报
月刊
1005-930X
45-1211/R
大16开
广西南宁市双拥路22号
1971
chi
出版文献量(篇)
11428
总下载数(次)
7
总被引数(次)
39554
相关基金
国家自然科学基金
英文译名:the National Natural Science Foundation of China
官方网址:http://www.nsfc.gov.cn/
项目类型:青年科学基金项目(面上项目)
学科类型:数理科学
论文1v1指导