SFRP2基因重组腺病毒载体的构建与鉴定

• 作者: 李世荣 王儆 王珍祥 陈亮 陈卓 陶熹
• 来源期刊: 中国美容医学
• 学科: 医学
• 关键词: SFRP2 腺病毒 增生性瘢痕 成纤维细胞
• 年，卷（期）: 2012,（15）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 1981-1984
• 页数: 4页
• 分类号: R318
• 字数: 3661字
• 语种: 中文

摘要

目的:成功构建携带SFRP2基因的腺病毒载体.方法:从pGBKT-SFRP2质粒中扩增SFRP2基因,将SFRP2基因亚克隆至质粒穿梭载体pAd-Track-CMV.用脂质体转染法将重组腺病毒pAd-Track-PPAR γ 2-CMV和pAdEasy-1共转染293细胞,成功构建的重组腺病毒Ad-SFRP2,确定转染效率.原代培养增生性瘢痕成纤维细胞,利用Ad-SFRP2感染该细胞.通过RT-PCR和Western Blot分别检测感染后人瘢痕成纤维细胞及对照组细胞中SFRP2基因mRNA和蛋白表达水平.结果:RT-PCR检测结果显示腺病毒Ad-SFRP2的PCR产物约为904bp,SFRP2 mRNA表达水平明显增高；用抗SFRP2多克隆抗体进行Western blot检测为阳性,感染的重组腺病毒载体在人瘢痕成纤维细胞中SFRP2蛋白有较高的稳定表达.结论:成功构建含有人SFRP2基因的重组腺病毒Ad-SFRP2;它可有效提高人增生性瘢痕成纤维细胞中SFRP2基因的表达水平.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	陈亮	重庆西南医院整形外科	3	3	1.0	1.0
2	王儆	葛洲坝东湖社区服务中心全科	2	3	1.0	1.0
3	陶熹	重庆西南医院整形外科	1	1	1.0	1.0
4	陈卓	重庆西南医院整形外科	1	1	1.0	1.0
5	王珍祥	重庆西南医院整形外科	1	1	1.0	1.0
6	李世荣	重庆西南医院整形外科	1	1	1.0	1.0