双重实时荧光PCR对流感病毒检测及分型方法的研究

• 作者: 吴海波 尤金彪 沃恩康 王巧刚 王怡婷 郭潮潭
• 来源期刊: 中国卫生检验杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 流感病毒 双重实时荧光PCR 分型
• 年，卷（期）: 2013,（1）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 1-4,8
• 页数: 5页
• 分类号: R446.5
• 语种: 中文

摘要

目的:建立双重实时荧光PCR方法用于流感病毒检测,实现对新甲型H1N1流感病毒,H1和H3亚型季节性流感病毒,H5和H9亚型禽流感病毒的亚型区分.方法:根据GenBank公布的基因序列,针对M基因保守区设计引物和探针,用于流感病毒检测和定量;针对HA基因设计引物和探针,用于病毒分型.建立和优化双重实时荧光PCR反应体系,进行敏感度和特异性评价,同时对32份已知亚型的流感病毒样本进行检测,验证所建方法的实用性.结果:基于M基因的实时荧光PCR方法定量范围为5×101到5×108个目的拷贝.经优化的双重实时荧光PCR方法对不同亚型流感病毒的检测灵敏度在50～500拷贝之间,各亚型之间没有交叉反应.建立的方法能够检测出本研究涉及的所有流感病毒标本,分型准确率达到96.9％.结论:建立的双重实时荧光PCR方法具有敏感度高,特异性好等优点,实现对流感病毒样本准确分型,适用于流感的鉴别诊断及病毒载量测定.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	沃恩康		36	44	4.0	5.0
2	王怡婷		36	54	5.0	6.0
3	郭潮潭		43	100	5.0	9.0
4	吴海波		22	91	5.0	9.0
5	尤金彪		12	14	1.0	3.0
6	王巧刚		8	3	1.0	1.0