诱导表达猪生长激素pGH载体系统构建及其在PK15细胞中表达验证

• 作者: 周荣 敖红 李奎 王楚端 白立景 鞠辉明
• 来源期刊: 农业生物技术学报
• 关键词: 猪生长激素(pGH) 四环素(TET-ON) 诱导表达
• 年，卷（期）: 2013,（4）
• 所属期刊栏目: 研究资源
• 页码范围: 483-488
• 页数: 6页
• 字数: 4195字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-7968.2013.04.014

摘要

为实现外源生长激素(GH)基因在特定时间、空间的可控表达,本研究构建四环素(TET-ON)表达载体系统,并在细胞水平对该载体系统进行诱导活性验证.结果表明:(1)成功构建了重组载体pTRE-GH12；(2)筛选建立了可诱导表达GH的细胞系；(3)利用强力霉素(doxycycline,DOX)诱导阳性细胞克隆并检测外源GH的表达,QRT-PCR结果表明,实验组细胞在DOX诱导后表达活性是诱导前264.481倍;对照组细胞在DOX诱导前诱导后表达无明显变化,实验组和对照组细胞间差异极显著(P＜0.01),实验组DOX诱导前后差异极显著(P＜0.01)；(4)Western杂交后灰度分析结果和QRT-PCR趋势一致,实验组和对照组细胞间GH蛋白表达量差异极显著(P＜0.01),实验组DOX诱导前后GH蛋白表达量差异极显著(P＜0.01).研究结果提示,四环素(TET-ON)诱导猪生长激素(GH)表达系统实现了可控表达,为以后制备可诱导表达GH的转基因动物提供了技术基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王楚端	中国农业大学动物科技学院	56	256	9.0	13.0
2	李奎	中国农业科学院北京畜牧兽医研究所	73	382	11.0	16.0
3	鞠辉明	扬州大学兽医学院	27	67	4.0	7.0
4	敖红	中国农业科学院北京畜牧兽医研究所	25	160	7.0	12.0
5	白立景	中国农业科学院北京畜牧兽医研究所	9	16	2.0	3.0
9	周荣	中国农业科学院北京畜牧兽医研究所	14	39	3.0	6.0