‘琯溪蜜柚’荧光定量PCR内参基因的筛选

• 作者: 杨莉 潘永娟 王梨嬛 蔡盛华 黄新忠
• 来源期刊: 果树学报
• 学科: 农学
• 关键词: ‘琯溪蜜柚’ 荧光定量PCR 内参基因
• 年，卷（期）: 2013,（1）
• 所属期刊栏目: 种质资源·遗传育种·分子生物学
• 页码范围: 48-54
• 页数: 7页
• 分类号: S666.3
• 语种: 中文

摘要

[目的]为了克隆‘琯溪蜜柚’的管家基因,并筛选合适的管家基因作为内参,[方法]以‘琯溪蜜柚’盛花期后5个不同时期的果实汁胞,以及根、茎、叶为材料,采用实时荧光定量PCR技术,分析actin1 、β-tubulin、18S rRNA、EF1-α和Ubiquitin 5个管家基因在不同材料中的表达情况,并结合geNorm、NormFinder、comparative Delta-CT和Best-Keeper4种评估方法进行稳定性分析.[结果]结果表明,actin1和β-tubulin是‘琯溪蜜柚’果实发育进程中较为稳定的内参基因,而EF1-α和β-tubulin则是研究不同组织特定靶基因表达中稳定的内参基因.[结论]筛选出了‘琯溪蜜柚’最佳的内参基因β-tubulin,为今后目的基因的表达分析奠定了基础.