Ⅳ型戊型肝炎病毒ORF3蛋白在人肝细胞中相互作用蛋白的筛选与鉴定

• 作者: 傅艳琨 华修国 吴更 崔立 郭亮
• 来源期刊: 上海交通大学学报（农业科学版）
• 学科: 农学
• 关键词: 戊型肝炎病毒 ORF3 免疫共沉淀 质谱 RPS18
• 年，卷（期）: 2013,（4）
• 页码范围: 83-87
• 页数: 5页
• 分类号: S852.65|R373.21
• 字数: 2868字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/J.ISSN.1671-9964.2013.04.015

摘要

戊型肝炎病毒编码3个开放性阅读框:ORF1,ORF2和ORF3,其中ORF3蛋白的功能目前尚不明确.为了进一步了解其功能,研究构建了ORF3哺乳动物表达载体pcDNA3.1Flag-ORF3,利用免疫共沉淀和LC/MS的方法筛选并鉴定肝细胞中可以和ORF3蛋白相互作用的蛋白.结果显示,成功构建了Ⅳ型戊型肝炎ORF3的重组表达载体,并利用免疫印迹检测其可以在哺乳动物细胞中正常表达ORF3蛋白,在肝癌细胞株HepG2中筛选并鉴定到了7个可能和ORF3相互用的蛋白,并推测其中RPS18的可能性较大,进而推测HEV可能通过ORF3与核糖体直接相互作用,从而影响其所感染的细胞中蛋白的正常翻译过程.本研究为进一步认识戊型肝炎病毒ORF3的功能提供了线索,进而有利于揭示戊型肝炎病毒的致病机理.