集胞藻PCC6803基因slr2049定点突变及其体内重组功能研究

• 作者: 朱超 陈思礼
• 来源期刊: 华中师范大学学报（自然科学版）
• 学科: 生物学
• 关键词: 色素裂合酶 藻蓝蛋白-β亚基 定点突变 体内重组
• 年，卷（期）: 2013,（3）
• 页码范围: 397-403
• 页数: 7页
• 分类号: Q812
• 字数: 5057字
• 语种: 中文

摘要

在Synechocystis sp.PCC 6803中找到与cpeS具有高度同源性的基因slr2049.采用PCR从Synechocystis sp.PCC 6803 DNA中扩增出cpcB,slr2049,hol,pcyA 4个基因；定点突变试剂盒构建8个突变体slr2049 (H21S)、slr2049 (L23S)、slr2049 (A24S)、slr2049 (F25S)、slr2049(W72L)、slr2049(G84S)、slr2049(R107S)和slr2049(Y124S)；将它们与表达载体pCDFDuet-1和pET-23a(+)相连构建pCDF-cpcB-slr2049野生型和pCDF-cpcB-slr2049突变体以及pET-ho1-pcyA,进行高效表达,用亲和层析柱纯化,产物用SDS-PAGE和光谱检测.研究表明:突变体slr2049(H21S)、slr2049(L23S)、slr2049(F25S)、slr2049 (W72L)、slr2049 (G84S)、slr2049(Y124S)与野生型slr2049催化获得的重组藻蓝蛋白β亚基具有与天然藻蓝蛋白β亚基相似的光谱特性,其他2个突变体slr2049 (A24S)和slr2049(R107S)催化的产物则没有光谱特性.由此推测,第24位丙氨酸和第107位精氨酸可能是slr2049酶活性的必需氨基酸,其所处位置是slr2049的活性位点.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	陈思礼	中南民族大学生命科学学院	47	170	7.0	11.0
2	朱超	中南民族大学生命科学学院	1	0	0.0	0.0