艰难梭菌毒素A C端结构域在大肠杆菌中的可溶性表达与卵黄抗体的制备

• 作者: 于锦丽 冯东晓 戴洁 李敏 林东海 董创创 郭桂萍 马慧文
• 来源期刊: 军事医学
• 学科: 医学
• 关键词: 艰难梭菌毒素A 重组蛋白 卵黄抗体(IgY)
• 年，卷（期）: 2013,（9）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 676-680
• 页数: 5页
• 分类号: R378
• 字数: 4403字
• 语种: 中文
• DOI: 10.7644/j.issn.1674-9960.2013.09.010

摘要

目的 重组表达艰难梭菌毒素A的C端结构域,制备针对艰难梭菌毒素A C端结构域的卵黄抗体.方法 将优化合成的艰难梭菌毒素A的C端结构域DNA片段克隆到表达载体pET32b(+)上,重组质粒转入大肠杆菌中诱导表达,经高亲和镍离子树脂纯化得到融合蛋白,凝血酶酶切后用高亲和镍离子树脂吸附多余多肽获得目的 蛋白.检测目的 蛋白的生物学活性,用目的 蛋白免疫产蛋鸡制备针对艰难梭菌毒素A受体结合区的鸡卵黄抗体,分离纯化鸡卵黄抗体并用ELISA测定卵黄抗体的效价.结果 获得了优化的艰难梭菌毒素A受体结合区的基因片段,继而制备了具有生物学活性的毒素A C端结构域重组蛋白.免疫产蛋鸡后获得了效价1∶50 000的抗艰难梭菌毒素A的卵黄抗体.结论 获得了具有生物学活性的艰难梭菌毒素A C端结构域重组蛋白,为建立艰难梭菌基因工程疫苗打下了基础,并制备了针对艰难梭菌毒素蛋白A的卵黄抗体,可用于艰难梭菌相关性腹泻的诊断和治疗.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	林东海	烟台大学药学院	30	164	8.0	11.0
2	于锦丽		2	9	2.0	2.0
3	郭桂萍	烟台大学药学院	6	13	2.0	3.0
4	董创创		2	7	1.0	2.0
5	戴洁		1	7	1.0	1.0
6	李敏		1	7	1.0	1.0
7	马慧文		1	7	1.0	1.0
8	冯东晓		1	7	1.0	1.0