番石榴焦腐病菌LAMP检测方法的建立及应用

• 作者: 兰成忠 刘裴清 吴敏亮 张溢溪 李本金 翁启勇 陈庆河
• 来源期刊: 植物病理学报
• 学科: 农学
• 关键词: 番石榴 葡萄座腔菌 内转录间隔区 环介导等温扩增 钙黄绿素
• 年，卷（期）: 2013,（6）
• 所属期刊栏目: 病原学
• 页码范围: 574-580
• 页数: 7页
• 分类号: S436
• 字数: 2729字
• 语种: 中文

摘要

以钙黄绿素(calcein)为指示剂,建立了番石榴焦腐病菌(Botryosphaeria rhodina)的环介导等温扩增(Loop-mediated isothermal amplification,LAMP)可视化快速检测方法.在该方法中,以番石榴焦腐病菌特异的核糖体转录间隔区(Internal transcribed spacer,ITS)序列为目的DNA片段,设计4条引物(2条内引物、2条外引物),优化LAMP反应条件和反应体系,并进行特异性和灵敏度验证.研究确定最佳反应温度为64℃,反应时间1h;特异性检测结果显示,15株不同地理来源的番石榴焦腐病菌和10份番石榴焦腐病病果组织LAMP产物均为阳性(绿色),而26株其它病原菌及10份健康番石榴果实组织LAMP产物均为阴性(橘黄色);灵敏度验证结果显示,该方法的检测灵敏度在DNA水平上可达到10 pg.实验结果表明,快速、准确、灵敏的LAMP检测方法适合基层部门及田间检测番石榴焦腐病菌使用.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	兰成忠	福建省农业科学院植物保护研究所	32	327	11.0	17.0
2	翁启勇	福建省农业科学院植物保护研究所	90	1358	23.0	33.0
3	陈庆河	福建农林大学植物保护学院	58	793	16.0	25.0
5	李本金	福建省农业科学院植物保护研究所	52	476	13.0	19.0
6	刘裴清	福建省农业科学院植物保护研究所	8	43	4.0	6.0
7	吴敏亮	福建农林大学植物保护学院	1	16	1.0	1.0
8	张溢溪	福建省农业科学院植物保护研究所	1	16	1.0	1.0