应用正交设计对大白菜纯度鉴定中EST-SSR反应体系的优化

• 作者: 兰青阔 朱珠 李欧静 王永 贺长征 赵新 郭永泽 陈锐 齐志伟
• 来源期刊: 天津农业科学
• 学科: 农学
• 关键词: 大白菜 纯度鉴定 正交设计 EST-SSR 优化
• 年，卷（期）: 2013,（3）
• 所属期刊栏目: 植物生理与生物技术
• 页码范围: 1-4
• 页数: 4页
• 分类号: S634.1
• 字数: 3104字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1006-6500.2013.03.001

摘要

以3份大白菜杂交种及其亲本为试验材料,利用改良CTAB法提取基因组DNA,采用正交设计对Mg2+、dNTPs、引物、模板DNA和Taq酶5因素4水平进行优化,结果表明,适用于大白菜纯度鉴定EST-SSR检测体系为:在10μL反应体系中包含3.0 mmol·L-1MgCl2、400 μmol·L-1dNTPs、0.20 μmol·L-1 SSR引物、4 ng模板DNA和0.05 U Taq酶.利用该优化的体系,对3份大白菜杂交种进行单株育苗试验,每份杂交种取单株140株进行纯度鉴定.结果显示,扩增带型清晰、稳定,纯度检测结果与田间试验结果基本吻合,可用于大白菜种子纯度分子标记的进一步研究.