流感病毒NS1蛋白稳定表达的A549细胞系建立

• 作者: 刘永飞 曾琳姣 李志辉 梅琳 王慧煜 韩雪清
• 来源期刊: 生命科学研究
• 学科: 农学
• 关键词: A型流感病毒 NS1蛋白 A549细胞系 稳定表达
• 年，卷（期）: 2013,（1）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 68-72
• 页数: 5页
• 分类号: S852.65+9.5
• 字数: 3568字
• 语种: 中文

摘要

A型流感病毒的NSl(Nonstructurol 1 protein,NSl)蛋白是病毒复制、毒力等的重要调节蛋白.运用RT-PCR方法扩增A/Beijing/501/2009 (H1N1)流感病毒NS1基因,克隆至真核表达载体pCMV-HA,用Lipofectamine 2000将线性化pCMV-HA-NS1与neo基因共同转染A549细胞,通过G418筛选获得阳性重组细胞,并采用PCR、RT-PCR、Western blot技术检测重组细胞中NS1蛋白的表达,通过免疫荧光技术观察NS1蛋白在细胞中的定位.PCR、RT-PCR检测显示NS1基因成功整合进入细胞基因组,并转录为mRNA;Western blot检测显示重组细胞系稳定表达NS1蛋白,免疫荧光显示NS1蛋白定位于细胞核内.表明通过G418筛选,成功构建稳定表达NS1蛋白的重组A549-HA-NS1细胞系,且NS1蛋白定位于细胞核内,为进一步研究NS1蛋白的生物学功能奠定基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	韩雪清		69	332	8.0	16.0
2	梅琳		51	226	8.0	13.0
3	王慧煜		30	81	5.0	7.0
4	李志辉		6	12	2.0	3.0
5	曾琳姣	天津大学化工学院	3	4	1.0	2.0
6	刘永飞	天津大学化工学院	2	3	1.0	1.0