PCGF1过表达慢病毒载体的构建及稳定过表达A549细胞系的建立

• 作者: 樊嵘 董瓅锦 赵正源 闫睿
• 来源期刊: 解放军医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 多梳家族环指蛋白1 肺肿瘤 转染
• 年，卷（期）: 2016,（11）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 892-895
• 分类号: R734.2
• 语种: 中文
• DOI: 10.11855/j.issn.0577-742.2016.11.03

摘要

目的 构建人多梳家族环指蛋白1(PCGF1)基因的慢病毒载体,建立稳定表达PCGF1基因的细胞系.方法 根据人PCGF1序列设计并合成引物,以A549细胞cDNA为模板,PCR扩增目的基因.双酶切目的基因并插入pLVX-IRES-puro质粒,对重组质粒进行慢病毒包装,用包装好的病毒感染A549细胞系,通过嘌呤霉素筛选阳性表达细胞,Western blotting验证PCGF1表达情况.结果 重组质粒经测序分析正确,瞬时转染293T细胞后,Western blotting验证PCGF1表达明显升高.包装慢病毒颗粒后感染A549细胞,经嘌呤霉素筛选后,Western blotting验证得到PCGF1稳定过表达的A549细胞系.结论 成功构建了pLVX-IRES-PCGF1-puro慢病毒过表达载体和PCGF1稳定过表达的A549细胞系,为进一步研究PCGF1的功能奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	闫睿	天津武警后勤学院附属医院胸外科	1	3	1.0	1.0
2	樊嵘	天津武警后勤学院科研部	1	3	1.0	1.0
3	董瓅锦	天津武警后勤学院科研部	1	3	1.0	1.0
4	赵正源	天津武警后勤学院附属医院胸外科	1	3	1.0	1.0