华东葡萄转录因子VpSBP3基因原核表达、纯化及多克隆抗血清制备

• 作者: 侯鸿敏 宋军阳 殷向静 王浩 王西平
• 来源期刊: 果树学报
• 学科: 农学
• 关键词: 华东葡萄 VpSBP3 转录因子 原核表达 多克隆抗血清
• 年，卷（期）: 2013,（5）
• 所属期刊栏目: 种质资源·遗传育种·分子生物学
• 页码范围: 737-743
• 页数: 7页
• 分类号: S663.1
• 语种: 中文

摘要

[目的]制备华东葡萄(Vitis pse udoreticulata)转录因子VpSBP3基因抗血清,为研究VpSBP3基因功能奠定基础.[方法]构建华东葡萄转录因子VpSBP3基因重组原核表达载体pGEX-VpSBP3,转化大肠杆菌(E.coli Rosetta (DE3),以IPTG为诱导剂诱导目的融合蛋白的表达.切胶电透析回收诱导表达的VpSBP3融合蛋白免疫新西兰兔,制备VpSBP3抗血清.[结果]重组原核表达载体pGEX-VpSBP3在DE3中高效表达出了分子质量为68 kD的GST-VpSBP3融合蛋白.回收的目的融合蛋白免疫新西兰兔后得到了抗血清,经Western-Blot检测,抗血清的免疫-抗原反应良好.[结论]在27℃、0.7 mmol· L-1 IPTG过夜培养的诱导条件下,融合蛋白GST-VpSBP3过量表达.免疫大白兔获得的血清特异性强,效价高,可用于VpSBP3基因功能分析.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	宋军阳		20	106	6.0	10.0
2	王西平		40	652	13.0	25.0
3	王浩		13	164	6.0	12.0
4	侯鸿敏		3	20	1.0	3.0
5	殷向静		1	0	0.0	0.0