c-di-GMP抑制转录调控因子Clpxoo与葡聚糖酶基因启动子的结合

• 作者: 何晨阳 吴茂森 李波 田芳 陈华民
• 来源期刊: 微生物学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 水稻白叶枯病菌 c-di-GMP 信号受体蛋白 启动子 结合作用
• 年，卷（期）: 2013,（11）
• 所属期刊栏目: 遗传和分子生物学
• 页码范围: 1166-1171
• 分类号: Q933
• 语种: 中文

摘要

[目的]阐明水稻白叶枯病菌(Xanthomonas oryzae pv.oryzae,Xoo)c-di-GMP信号受体和转录调控因子Clpxoo对葡聚糖酶基因(engAxoo)的转录调控作用机制.[方法]通过基因表达载体的构建和转化、蛋白诱导表达及其Ni-NTA Resin亲和层析,进行了clpxoo基因的原核表达和产物纯化.通过荧光素(FAM)探针标记和凝胶阻滞试验(EMSA)对Clpxoo纯化蛋白与葡聚糖酶基因启动子(engAxoo-p)的结合活性及其c-di-GMP信号分子的抑制作用进行了测定分析.[结果]在优化的诱导表达和纯化条件下,成功地获得了Clpxoo纯化蛋白.Clpxoo可与engAxoo-p序列发生阻滞现象,表明它具有与启动子特异性结合的活性.在反应体系中加入c-di-GMP可导致结合作用的消除.[结论]Clpxoo接受c-di-GMP信号后,可能通过构象的改变,从而与engAxoo-p的结合活性受到抑制；优化的Clpxoo蛋白纯化和EMSA方法可以用于后续的调控元大规模鉴定的研究.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	田芳	中国农业科学院植物保护研究所植物病虫害生物学国家重点实验室	22	83	5.0	7.0
2	陈华民	中国农业科学院植物保护研究所植物病虫害生物学国家重点实验室	27	104	5.0	7.0
3	何晨阳	中国农业科学院植物保护研究所植物病虫害生物学国家重点实验室	41	269	10.0	13.0
4	吴茂森	中国农业科学院植物保护研究所植物病虫害生物学国家重点实验室	37	309	11.0	15.0
5	李波	中国农业科学院植物保护研究所植物病虫害生物学国家重点实验室	16	206	9.0	14.0