Rab39A多克隆抗体的制备与鉴定

• 作者: 张明 杨婷 王卫杰 王团老 马琳琳
• 来源期刊: 厦门大学学报（自然科学版）
• 学科: 医学
• 关键词: Rab39A 原核表达 多克隆抗体
• 年，卷（期）: 2013,（1）
• 页码范围: 116-121
• 页数: 6页
• 分类号: R392.1
• 字数: 3686字
• 语种: 中文

摘要

制备抗人Rab39A多克隆抗体并进行纯化检测,以用于Rab39A功能的研究.选取免疫原性强且特异性高的羧基端42个氨基酸(176～217aa)作为目的片段.PCR法扩增并构建重组表达质粒pGEX-4T-1-Rab39C42.异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达并纯化GST-Rab39C42融合蛋白,免疫新西兰兔,制备多克隆抗体.然后以亲和层析法纯化抗体,利用Western blot和免疫荧光检测抗体的特异性.结果表明,构建的原核表达载体经IPTG诱导后高效表达GST-Rab39C42蛋白,纯化后抗体质量浓度为1μg/μL;Western blot实验显示,抗体可以识别外源Rab39A蛋白和多个细胞系的内源Rab39A蛋白；抗体中和实验和RNA干扰实验证明了该抗体具有特异性.本研究成功构建了pGEX-4T-1-Rab39C42原核表达载体,并制备了特异性的抗人Rab39A兔多克隆抗体,为进一步研究Rab39A的功能提供了有力的支持.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张明	厦门大学药学院	9	27	4.0	5.0
2	王团老	厦门大学药学院	5	5	1.0	2.0
3	马琳琳	厦门大学药学院	1	0	0.0	0.0
4	杨婷	厦门大学药学院	1	0	0.0	0.0
5	王卫杰	厦门大学药学院	1	0	0.0	0.0