cnksr2基因干扰腺病毒的构建及鉴定

• 作者: 徐康 李朝军 梁金 沈宁 薛斌
• 来源期刊: 南京师大学报（自然科学版）
• 学科: 生物学
• 关键词: cnksr2基因 干扰 腺病毒
• 年，卷（期）: 2013,（3）
• 所属期刊栏目: 生命科学
• 页码范围: 103-107
• 页数: 5页
• 分类号: Q291
• 字数: 3827字
• 语种: 中文

摘要

构建小鼠cnksr2基因干扰腺病毒质粒载体并加以鉴定.根据小鼠cnksr2基因序列设计cnksr2干扰序列引物,定向克隆至穿梭载体pshuttle-H1的BglⅡ和HinndⅢ位点,PmeI酶切线性化的pShuttle-H1-Sicnksr2干扰质粒,并与腺病毒载体(pAdEasy-1质粒)共同转化E.coli BJ5183感受态细菌,产生重组腺病毒载体.用Pac I酶切线性化的回收质粒,转染293A细胞,包装腺病毒颗粒,在倒置显微镜下观察细胞病理性变化(Cellpathological effect,CPE),用TCID50法测定病毒颗粒的浓度,并初步观察病毒感染PC12细胞对目的基因的干扰效率.经酶切鉴定、测序证实成功构建小鼠cnksr2基因干扰腺病毒载体.包装的腺病毒浓缩悬液滴度为3.98×10 7PFU/mL.cnksr2在大鼠及小鼠中具有保守性,该病毒能在大鼠来源的PC12细胞中成功表达,并且对cnksr2基因干扰效率达50％以上.结论:成功构建了小鼠cnksr2基因的干扰腺病毒载体.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李朝军	南京大学医学院江苏省医学分子技术重点实验室	9	15	2.0	3.0
2	梁金	南京大学医学院江苏省医学分子技术重点实验室	2	2	1.0	1.0
3	薛斌	南京大学医学院江苏省医学分子技术重点实验室	7	21	2.0	4.0
4	徐康	南京师范大学生命科学学院江苏省分子医学生物技术重点实验室	3	2	1.0	1.0
5	沈宁	南京大学医学院江苏省医学分子技术重点实验室	1	0	0.0	0.0