草鱼 Sm ad4基因的克隆、生物信息学分析及反义真核载体的构建

• 作者: 余德光 吕池波 李志斐 王广军 王海英 谢骏 郁二蒙 龚望宝
• 来源期刊: 华南农业大学学报
• 学科: 农学
• 关键词: 草鱼 Smad4 反义基因 真核表达载体 胚胎发育 生物信息学分析
• 年，卷（期）: 2013,（4）
• 所属期刊栏目: 生物学
• 页码范围: 517-523
• 页数: 7页
• 分类号: Q78|S917.4
• 字数: 5019字
• 语种: 中文

摘要

为了研究TGF-β信号传导中的关键蛋白Smad4在草鱼Ctenopharyngodon idellus发育过程中的作用，克隆出草鱼Smad4基因cDNA全序列，其碱基长度为2974 bp，其中开放阅读框1644 bp，编码547个氨基酸．生物信息学分析结果显示，草鱼Smad4蛋白相对分子质量为59690.3，分子式为C2632 H4073 N753 O791 S24，理论等电点为6.5，含有MH1和MH2这2个高度保守的功能结构域．BLAST相似性分析显示，草鱼Smad4蛋白的氨基酸序列与鲤鱼Cypri-nus carpio、斑马鱼Danio rerio的相似性较高，分别为94.23％和92.97％．还将草鱼Smad4基因的开放阅读框片段反向插入表达载体pcDNA3.1（＋），成功构建了反义Smad4基因真核表达载体pcDNA3.1（＋）-Anti-Smad4．