乙型脑炎病毒 EDⅢ蛋白的表达纯化及在 Array-ELISA 方法中的应用

• 作者: 吴晓燕 康晓平 张晓松 李裕昌 杨银辉 郑旸
• 来源期刊: 中华微生物学和免疫学杂志
• 关键词: 乙型脑炎病毒 EDⅢ蛋白 克隆 Array-ELISA
• 年，卷（期）: 2013,（12）
• 所属期刊栏目: 疫苗学与应用技术
• 页码范围: 954-959
• 页数: 6页
• 字数: 4266字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.0254-5101.2013.12.013

摘要

目的：拟在大肠杆菌中高效表达纯化乙型脑炎病毒EDⅢ蛋白，希望能为乙型脑炎（乙脑）病毒（ JEV）感染血清的诊断试剂盒提供候选抗原。方法针对乙脑病毒的EDⅢ蛋白设计特异的PCR扩增引物，对提取的乙脑病毒RNA进行RT-PCR扩增，获取目的基因并构建重组质粒，将重组质粒转入E．coli BL21中并在IPTG作用下表达目的蛋白。将表达的乙型脑炎病毒EDⅢ抗原系列稀释后与对照抗原同时点制在ELISA微孔板中，采用Array-ELISA技术同时检测临床JEV感染患者及正常人血清，并与间接免疫荧光方法的检测结果进行比较。结果成功克隆了JEV EDⅢ蛋白基因段，并在E．coli BL21中表达，成功获得EDⅢ蛋白。该重组蛋白可用于Array-ELISA方法，进行JEV感染血清的检测，并且与传统免疫学检测方法---间接免疫荧光法结果一致。结论该重组抗原可作为JEV感染血清检测的候选抗原。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	吴晓燕	军事医学科学院微生物流行病研究所	9	61	6.0	7.0
2	杨银辉	军事医学科学院微生物流行病研究所	12	82	5.0	8.0
3	康晓平	军事医学科学院微生物流行病研究所	9	28	4.0	5.0
4	郑旸	军事医学科学院微生物流行病研究所	2	5	1.0	2.0
5	李裕昌	军事医学科学院微生物流行病研究所	6	15	2.0	3.0
6	张晓松	军事医学科学院微生物流行病研究所	1	1	1.0	1.0