乙型脑炎病毒膜蛋白B区多肽抗原的表达、纯化及血清学评价

• 作者: 周惠琼 柯昌文 梁文燕 江立敏 郑夔 顾耀亮
• 来源期刊: 中国人兽共患病学报
• 学科: 医学
• 关键词: 乙型脑炎病毒 包膜糖蛋白B区 原核表达系统 蛋白纯化
• 年，卷（期）: 2007,（1）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 53-55,82
• 页数: 4页
• 分类号: R5
• 字数: 1890字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1002-2694.2007.01.013

摘要

目的 在原核表达系统中对乙型脑炎病毒包膜糖蛋白(E蛋白)的B区多肽抗原进行高效表达、纯化及血清学评价.方法 利用PCR技术从乙脑减毒活疫苗中扩增编码B区的DNA片段,酶切消化后连接到表达载体pET22b上,用此连接产物转化大肠埃希菌BL21(DE3)并表达B区多肽抗原,表达产物经液相层析纯化;用乙脑病人血清对纯化后的B区多肽抗原进行评价.结果 重组质粒pET22b-JEB经双酶切,其插入的外源基因片段为372 bp,与预期DNA片段大小一致.将纯化前与纯化后的蛋白作SDS-PAGE电泳,均可见一条约16kD的外源基因蛋白带,与计算的相对分子质量相符.经WB和ELISA血清学评价,表明重组B区多肽抗原具有较高的灵敏性及特异性.结论 成功构建了表达载体pET22b-JEB,在原核系统中表达的B区多肽抗原具有良好的血清学检测价值.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	柯昌文		154	1211	18.0	26.0
2	周惠琼		29	325	9.0	17.0
3	郑夔		17	159	7.0	12.0
4	顾耀亮		8	60	4.0	7.0
5	江立敏		5	25	2.0	5.0
6	梁文燕		3	15	2.0	3.0