4种血清型登革病毒多表位重组抗原的表达及血清学初步评价

• 作者: 代友超 余诗炎 庄泽岗 张俊爱 徐军发 易方浩 王鑫 贾岩 郑碧英 陈晨 黎四平
• 来源期刊: 中国人兽共患病学报
• 学科: 医学
• 关键词: 登革病毒 抗原蛋白 原核表达 血清学评价
• 年，卷（期）: 2017,（1）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 32-37
• 页数: 6页
• 分类号: R373.3
• 字数: 3848字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1002-2694.2017.01.006

摘要

目的 在原核表达系统中对登革病毒包膜蛋白(E蛋白)和非结构蛋白1(NS1)融合的B细胞抗原表位进行表达、纯化及血清学评价.方法 将B细胞抗原表位用形成α螺旋的连接肽(EAAAK)2作为接头,串联合成1条全新的多表位融合重组基因rE,将其克隆到原核表达载体pET-28a(+)中,转化大肠杆菌BL21 (DE3)后经IPTG诱导表达融合蛋白,用镍柱对重组蛋白纯化,并用SDS-PAGE和Western blot方法鉴定表达产物.以融合蛋白为抗原,用间接ELISA检测登革热病人血清IgM抗体.结果 重组表达载体pET28a-rE构建成功,并在大肠杆菌BL21(DE3)中成功表达.融合蛋白主要以包涵体形式存在,用镍柱纯化获得高纯度的目的蛋白,SDS-PAGE和Western blot检测结果显示蛋白分子量大小与预期结果相符,建立的间接ELISA具有较高的准确性.结论 原核表达的登革病毒多表位融合蛋白具有良好的血清学检测价值.