4种血清型登革病毒外膜蛋白重组抗原的表达

• 作者: 严延生 张志珊 林梅清 王金章 翁育伟 郑奎城 黄萌
• 来源期刊: 中国人兽共患病学报
• 学科: 医学
• 关键词: 登革病毒 外膜蛋白 重组抗原 表达
• 年，卷（期）: 2012,（9）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 894-897
• 分类号: R373.3
• 字数: 3305字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/cjz.j.issn.1002-2694.2012.09.007

摘要

目的 在大肠杆菌中表达重组1-4型登革病毒外膜蛋白,为研制登革病毒抗体快速检测试剂提供原材料.方法 根据基因序列设计、合成引物并经PCR方法扩增1-4型登革病毒部分外膜蛋白基因片段,克隆至表达载体pET30a(+)并在大肠杆菌中诱导表达.小量表达以及纯化后的重组蛋白做SDS-PAGE分析并经WB实验验证其免疫活性.结果 酶切消化及电泳结果表明4种重组质粒均构建成功.经IPTG诱导后,4种重组大肠杆菌均可表达相应的重组蛋白.纯化前后的重组蛋白经WB实验表明,4种重组蛋白均能与对应型别的病毒感染者血清反应.结论 利用大肠杆菌表达系统,成功表达重组1-4型登革病毒外膜蛋白,4种型别的重组蛋白可被各自血清型的抗体结合,均具有免疫反应活性.