登革热病毒Ⅰ型外膜蛋白DⅢ区的克隆、表达及重组蛋白的应用

• 作者: 严延生 何似 张志珊 李世清 沈晓娜 翁育伟
• 来源期刊: 中国人兽共患病学报
• 学科: 医学
• 关键词: 登革热病毒 外膜蛋白基因 基因表达
• 年，卷（期）: 2006,（4）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 301-305
• 页数: 5页
• 分类号: R373.3
• 字数: 3786字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1002-2694.2006.04.004

摘要

目的选取DVⅠ外膜蛋白DⅢ区基因进行克隆、表达和纯化,以获得能应用于血清学诊断的纯化重组蛋白.方法用RT-PCR和套式PCR法扩增登革病毒Hawaii株外膜蛋白DⅢ区基因,与表达载体pET-30 a连接,构建重组表达载体,在大肠杆菌BL21(DE3)中表达,重组蛋白经Western-blot鉴定活性后用电洗脱法进行纯化.纯化的重组蛋白用间接ELISA法和捕获ELISA法应用于血清学检测,检测结果与间接免疫荧法进行比较.结果重组表达质粒在大肠杆菌中表达高产量的重组蛋白,Western-blot结果显示重组蛋白具有免疫活性.纯化的重组蛋白对登革热病毒Ⅰ型感染者具有很高的检出率,与间接免疫荧光法检测结果基本相符.结论 DVⅠ外膜蛋白DⅢ区基因在大肠杆菌中成功表达,重组蛋白可应用于血清学检测.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	严延生		161	1086	15.0	24.0
2	张志珊		9	38	4.0	6.0
5	翁育伟		50	174	6.0	10.0
6	沈晓娜		34	122	7.0	8.0
7	何似		31	182	7.0	11.0
8	李世清		17	82	6.0	7.0