一种高效快速鉴定酵母转化子的酵母菌落PCR方法

• 作者: 刘泽寰 吕一鸣 李晶博 林蒋海 武可婧 肖文娟 龚映雪
• 来源期刊: 生物技术通报
• 关键词: 酿酒酵母 菌落PCR 转化子 阳性克隆
• 年，卷（期）: 2013,（12）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 137-140
• 语种: 中文

摘要

酵母是一种重要的基因工程宿主菌,但是由于其细胞壁结构复杂牢固,普通的菌落PCR方法的成功率较低.为解决此问题,提供一种快速、简单、高效的酵母菌落PCR方法.该方法先利用溶壁酶溶解酵母细胞壁,然后利用热涨裂解细胞并进行PCR反应.此方法将酵母细胞裂解和PCR在同一个PCR管中完成.试验结果显示此方法能成功扩增目的基因且成功率高.将此方法应用于外源性内切葡聚糖酶(endoglucanase,EG)的酿酒酵母转化子筛选,经与基因组PCR比较,菌落PCR与基因组PCR结果一致.结果证明此方法具有良好的稳定性,适用于酿酒酵母转化子的快速筛选.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李晶博	暨南大学生命科学技术学院	4	4	1.0	1.0
2	林蒋海	暨南大学生命科学技术学院	9	26	2.0	4.0
3	肖文娟	暨南大学生命科学技术学院	14	66	5.0	7.0
4	刘泽寰	暨南大学生命科学技术学院	17	76	6.0	8.0
5	龚映雪	暨南大学生命科学技术学院	14	85	6.0	8.0
6	武可婧	暨南大学生命科学技术学院	1	2	1.0	1.0
7	吕一鸣	暨南大学生命科学技术学院	1	2	1.0	1.0