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摘要:
利用人白细胞cDNA文库体外扩增获得hIL23R-CHR目的基因,克隆至原核表达载体pET22b/pET28a/pET32a,转化BL21(DE3)宿主菌,并对工程菌的表达方式(直接表达、可溶性标签融合表达、分泌表达及包涵体表达)及表达量进行比较,确立pET 32a为表达载体,经IPTG诱导表达后通过镍亲和柱分离纯化融合蛋白Trx-IL23R-CHR,肠激酶4℃酶切Trx-IL23R-CHR分子24 h,上镍柱进行二次纯化,获得纯度达90%以上的rhIL23R-CHR分子.亲和力实验证实:原核重组表达的hIL23 R-CHR与hIL23在物质的量比为1∶1时可以有效结合,小脑HE病理切片提示rhIL23R-CHR分子对实验性变态反应性脑脊髓炎(EAE)模型鼠有一定的保护作用.
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文献信息
篇名 可溶性重组人IL23R-CHR在大肠埃希菌中的表达、纯化及活性研究
来源期刊 中国药科大学学报 学科 生物学
关键词 IL-23 hIL23R-CHR 原核表达 分离纯化
年,卷(期) 2013,(6) 所属期刊栏目 论文
研究方向 页码范围 583-588
页数 6页 分类号 Q786
字数 5073字 语种 中文
DOI 10.11665/j.issn.1000-5048.20130619
五维指标
作者信息
序号 姓名 单位 发文数 被引次数 H指数 G指数
1 高向东 中国药科大学生命科学与技术学院分子生物学教研室 188 1604 21.0 30.0
2 郭薇 中国药科大学生命科学与技术学院分子生物学教研室 9 9 2.0 3.0
3 王宇恒 中国药科大学生命科学与技术学院分子生物学教研室 8 4 1.0 2.0
4 王辰 中国药科大学生命科学与技术学院分子生物学教研室 6 4 1.0 2.0
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IL-23
hIL23R-CHR
原核表达
分离纯化
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中国药科大学学报
双月刊
1000-5048
32-1157/R
大16开
南京市童家巷24号28信箱
28-115
1956
chi
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43758
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