牛奶β‐酪蛋白和大豆β‐伴球蛋白双抗制备及夹心ELISA快速定性检测技术的建立

• 作者: 林赛君 潘建红 王红青 肖海龙* 赵凯
• 来源期刊: 浙江大学学报(农业与生命科学版)
• 学科: 工学
• 关键词: β‐酪蛋白 β‐伴球蛋白 单克隆抗体 酶联免疫吸附测定
• 年，卷（期）: 2013,（2）
• 页码范围: 222-226
• 分类号: TS252
• 字数: 3716字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3785/j.issn.1008‐9209.2012.11.617

摘要

采用牛奶β‐酪蛋白和大豆β‐伴球蛋白分别免疫BALB/c小鼠,4次免疫后,通过脾脏细胞杂交瘤技术及间接酶联免疫吸附测定( enzyme‐linked immunosorbent assay , ELISA)筛选制备单克隆抗体,同时分别制备兔抗β‐酪蛋白和β‐伴球蛋白多克隆抗体;通过棋盘滴定法,初步确定单克隆抗体和多克隆抗体的最佳工作浓度,建立双抗夹心ELISA用于乳品掺假以及牛奶、大豆过敏原成分的快速定性检测畅结果表明:通过免疫和杂交瘤技术分别获得了抗β‐酪蛋白和β‐伴球蛋白的单克隆抗体,纯化后2种抗体的效价均达到1∶1×107,通过免疫兔制备的2种多克隆抗体经纯化后效价在1∶2×105左右;所建立的双抗夹心ELISA方法的最低检测限为15 ng/mL ,与其他物种的蛋白不发生交叉反应,具有良好的特异性畅这为建立乳品掺假及过敏原成分快速检测奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	赵凯		18	86	6.0	9.0
2	王红青		17	67	6.0	8.0
3	林赛君		12	107	6.0	10.0
4	肖海龙*		1	6	1.0	1.0
5	潘建红		1	6	1.0	1.0