甘蔗可溶性酸性转化酶（SoSAI1）基因的克隆及表达分析

• 作者: 朱惠 李杨瑞 杨丽涛 牛俊奇 王爱勤 黄静丽
• 来源期刊: 中国农业科学
• 关键词: 甘蔗 可溶性酸性转化酶 基因克隆 表达分析
• 年，卷（期）: 2013,（24）
• 所属期刊栏目: 研究简报
• 页码范围: 5248-5260
• 页数: 13页
• 语种: 中文
• DOI: 10.3864/j.issn.0578-1752.2013.24.019

摘要

[目的]克隆甘蔗可溶性酸性转化酶基因（SoSAI1）全长cDNA序列和5′侧翼启动子序列，并分析其序列特征和基因表达模式。[方法]利用RACE技术克隆SoSAI1的全长cDNA序列，应用生物信息学软件分析SoSAI1预期编码蛋白特征；采用Genome Walking技术克隆SoSAI1的启动子序列；采用实时荧光定量PCR分析不同生长期SoSAI1在甘蔗叶和茎中的表达，以及PEG 6000、100 mmol·L-1 NaCl和6℃胁迫下，SoSAI1在甘蔗苗期根和叶中表达模式。[结果]SoSAI1的cDNA序列全长为2387 bp，ORF长2058 bp，编码685个氨基酸，预测其分子量和等电点分别为74.44 kD和5.6，GenBank登录号为JQ406875。5′侧翼启动子序列长417 bp，含有胚乳特异表达顺式作用元件和参与干旱诱导的MYB结合位点，GenBank登录号为KC862314。SoSAI1表达在生理成熟期的花序和花序轴中较高，而在成熟茎和老茎中较低。15%PEG和6℃能诱导叶中SoSAI1表达，而15%PEG和NaCl能诱导根中SoSAI1表达。[结论]获得SoSAI1全长cDNA序列和部分启动子序列，SoSAI1在甘蔗生长发育和蔗糖积累，并在应对环境胁迫中发挥作用。