西方马脑炎核酸疫苗表达载体构建及免疫原性研究

• 作者: 吴红霞 夏咸柱 杨松涛 王化磊 王铁成 赵永坤 郑学星 马金柱
• 来源期刊: 激光生物学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 西方马脑炎病毒 载体构建 核酸疫苗 免疫原性
• 年，卷（期）: 2013,（3）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 243-248
• 页数: 6页
• 分类号: Q939.91|Q939.4
• 字数: 3975字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1007-7146.2013.03.009

摘要

为构建西方马脑炎病毒(western equine encephalomyelitis virus,WEEV)结构基因C-E3-E2-6k-E1重组真核表达载体,并研究其作为核酸疫苗的免疫原性.采用PCR方法扩增目的基因,酶切之后连接到pcDNA3.1上构建真核表达载体pcDNA3.1-C-E,用酶切和测序分析方法鉴定正确后,重组质粒被转染到293T细胞,经电镜检测和间接免疫荧光方法证明基因可以表达后,用该重组质粒免疫小鼠,免疫后检测实验组小鼠外周血中CD4+T细胞/CD8+T细胞比例和血清中细胞因子IL-2、IL-4及IFN-γ浓度,以上实验组各项免疫指标与对照组相比差异均显著(P＜ 0.05);ELISA方法检测实验组小鼠血清中WEEV的IgG抗体效价是1∶16.研究结果表明重组质粒pcDNA3.1-C-E可在细胞中获得瞬时表达,并且重组质粒作为核酸疫苗能够刺激小鼠产生免疫反应,具有较强免疫原性,为今后WEEV核酸疫苗研制奠定了良好基础.