弓形虫棒状体蛋白18的原核表达及免疫分析

• 作者: 吴焜 王素凡 陈晓光 陈滨 齐辰
• 来源期刊: 中国人兽共患病学报
• 学科: 医学
• 关键词: 刚地弓形虫 棒状体蛋白18 基因克隆 原核表达 免疫分析
• 年，卷（期）: 2013,（3）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 211-215
• 页数: 5页
• 分类号: R382.5
• 字数: 3701字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/cjz.j.issn.1002-2694.2013.03.001

摘要

目的 克隆刚地弓形虫ROP18基因,进行原核表达及重组蛋白的免疫分析.方法 提取弓形虫RH株基因组DNA,经PCR获得ROP18基因片段,经双酶切分别连入原核表达载体pET-28a(+)和pET-32a(+),构建重组表达载体pET28a-ROP18和pET32a-ROP18,并转化大肠杆菌BL21(DE3).IPTG诱导表达后,收集菌体进行SDS-PAGE电泳及Western-blot检测.结果 PCR得到约1 665 bp目的 基因片段,单、双酶切及PCR鉴定结果显示成功构建重组表达载体pET28a-ROP18和pET32a-ROP18;经IPTG诱导后,ROP18基因在大肠杆菌中高效表达;SDS-PAGE电泳及Western-blot分析显示,pET28a-ROP18在相对分子质量约60 kD的位置出现目的 蛋白条带,pET32a-ROP18在相对分子质量约83 kD的位置出现目的 蛋白条带,均与理论值相符;Western-blot结果显示重组蛋白与弓形虫慢性感染小鼠血清具有特异免疫反应性.结论 成功克隆和表达了ROP18基因,所表达的重组蛋白具有免疫效应,为其功能研究奠定基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	陈滨	南方医科大学公共卫生与热带医学学院病原生物学系	65	502	13.0	19.0
2	陈晓光	南方医科大学公共卫生与热带医学学院病原生物学系	92	699	14.0	19.0
3	吴焜	南方医科大学公共卫生与热带医学学院病原生物学系	22	160	7.0	11.0
4	齐辰	南方医科大学公共卫生与热带医学学院病原生物学系	2	16	2.0	2.0
5	王素凡	南方医科大学公共卫生与热带医学学院病原生物学系	1	6	1.0	1.0