弓形虫分泌蛋白ROP2的原核重组表达与免疫反应性鉴定

• 作者: 杨英超 洪彩玲 甘绍伯 薛峰 谷俊朝 黄敏君
• 来源期刊: 寄生虫与医学昆虫学报
• 关键词: 刚地弓形虫 棒状体蛋白ROP2 原核重组表达 免疫反应性
• 年，卷（期）: 2014,（2）
• 所属期刊栏目: 著述
• 页码范围: 75-80
• 页数: 6页
• 字数: 3799字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1005-0507.2014.02.001

摘要

本研究在大肠杆菌工程菌中重组表达弓形虫棒状体蛋白2 (ROP2),并初步评价其免疫反应性.主要步骤为体外细胞培养速殖子,提取总RNA,反转录获得cDNA,PCR扩增ROP2基因全长,与pET-41 Ek/LIC载体通过基因重组直接连接,在大肠杆菌RosettaTM (DE3) pLysS工程菌中诱导表达重组融合蛋白GST-6×His-ROP2,最后以重组蛋白与人源弓形虫抗血清的Western blotting反应评价rROP2免疫反应性.本研究获得了ROP2全长重组蛋白,初步证明其良好的免疫反应性,为进一步改进弓形虫免疫学诊断方法,研究分泌蛋白与宿主细胞的相互作用奠定了基础.