弓形虫ROP5基因真核表达载体的构建及其免疫保护性的研究

• 作者: 周松林 林映莹 王华 谭光宏 赵焕阁 郭峻莉 黄凤迎 黄用豪
• 来源期刊: 中国人兽共患病学报
• 学科: 医学
• 关键词: 弓形虫 ROP5 真核表达质粒 免疫保护
• 年，卷（期）: 2012,（9）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 947-950
• 分类号: R382.5
• 字数: 3074字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/cjz.j.issn.1002-2694.2012.09.018

摘要

目的 构建弓形虫pcDNA-ROP5真核表达载体,观察弓形虫ROP5基因在小鼠体内诱导的免疫反应.方法 克隆弓形虫ROP5基因,将其插入真核表达载体pcDNA-3.1中构建重组质粒pcDNA-ROP5,脂质体法转染Hela细胞体外表达蛋白,蛋白质印迹(Western blotting)分析鉴定.将45只小鼠随机均分为3组,分别为PBS组、空质粒组、pcDNA3.1-ROP5组,每2 w肌注免疫(100 μg/只)1次,共3次,于免疫前及每次免疫前1 d和末次免疫后2 w收集小鼠血清,用间接ELISA法检测血清抗弓形虫的IgG.各组小鼠腹腔注射RH株弓形虫速殖子1 000个/每鼠,观察小鼠受攻击感染后的存活时间.结果 真核表达载体构建成功,Western blotting分析结果显示,重组质粒pcDNA3.1-ROP5能在Hela细胞表达,蛋白相对分子质量为61 kDa.pcDNA3.1-ROP5末次免疫后血清中IgG水平显著高于其他组,pcDNA-ROP5免疫的小鼠与对照组相比,实验组小鼠产生了明显的体液免疫应答.攻击感染试验中,实验组的小鼠比对照组的存活时间有明显延长.结论 构建的真核表达重组质粒pcDNA-ROP5对抗击弓形虫攻击感染能够激发一定的免疫保护性.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	郭峻莉	海南医学院海南省热带病重点实验室	16	33	3.0	5.0
2	赵焕阁	海南医学院海南省热带病重点实验室	17	38	3.0	5.0
3	林映莹	海南医学院海南省热带病重点实验室	17	38	3.0	5.0
4	周松林	海南医学院海南省热带病重点实验室	20	61	4.0	7.0
5	黄凤迎	海南医学院海南省热带病重点实验室	3	16	1.0	3.0
6	王华	海南医学院海南省热带病重点实验室	19	47	3.0	6.0
7	黄用豪	海南医学院海南省热带病重点实验室	25	52	3.0	6.0