弓形虫ROP2基因的克隆及在大肠杆菌中的表达

• 作者: 吴昆 支国舟 陈晓光
• 来源期刊: 寄生虫与医学昆虫学报
• 学科: 医学
• 关键词: 刚地弓形虫 ROP 2 基因克隆 融合表达
• 年，卷（期）: 2004,（3）
• 所属期刊栏目: 著述
• 页码范围: 135-138
• 页数: 4页
• 分类号: R3
• 字数: 2716字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1005-0507.2004.03.002

摘要

目的:构建弓形虫棒状体蛋白(ROP2)基因重组质粒并在大肠杆菌中表达,用于筛选弓形虫新的诊断抗原和疫苗分子.方法:根据ROP2基因已知序列,设计合成一对引物,用PCR方法从弓形虫RH株基因组DNA中扩增出ROP2基因片段,再克隆到pGEX-4T-1质粒,重组质粒经酶切及PCR鉴定,而后进行测序;重组质粒在大肠杆菌BL21(DE3)中进行ITPG诱导表达,表达产物经SDS-PAGE及Western Blot分析.结果:ROP2基因PCR产物大小与预期相符,约1 043bp,重组质粒经酶切及PCR鉴定表明获得正确重组子,测序结果与已知序列基本吻合;SDS-PAGE及免疫印迹显示ROP2融合蛋白表观分子量约为55kDa,表达产物约占菌体总蛋白17%,具有一定的免疫反应性.结论:克隆并表达了弓形虫ROP2基因,为下一步弓形虫诊断及疫苗研究奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	陈晓光	第一军医大学寄生虫学教研室	59	689	17.0	23.0
2	吴昆	第一军医大学寄生虫学教研室	5	56	4.0	5.0
3	支国舟	第一军医大学寄生虫学教研室	9	28	3.0	5.0