重组结核分枝杆菌ESAT-6的克隆与表达

• 作者: 孙文霞 杨双 王云 袁仕善 谭云洪 邓志高
• 来源期刊: 湖南师范大学学报（医学版）
• 学科: 生物学
• 关键词: 结核分枝杆菌 ESAT-6 克隆 表达
• 年，卷（期）: 2013,（3）
• 页码范围: 8-10,14
• 页数: 4页
• 分类号: Q785
• 字数: 2315字
• 语种: 中文

摘要

目的：克隆和表达结核分枝杆菌ESAT-6。方法：以结核分枝杆菌H37Rv基因组DNA为模板，利用聚合酶链式反应(PCR)扩增esat-6基因片段，克隆至pMD18-T载体，PCR筛选阳性克隆并测序。将esat-6基因亚克隆至pET-28a，构建pET-esat-6重组质粒，转化入大肠杆菌BL21感受态，PCR和双酶切鉴定阳性克隆，经IPTG诱导表达，用His-bindTM亲和层析柱纯化ESAT-6，SDS-PAGE和Western blotting鉴定。结果：PCR扩增出esat-6基因的特异片段，成功构建重组表达质粒pET-esat-6，并在BL21获得表达，纯化的ESAT-6能被结核病人血清所识别。结论：成功克隆和表达获得重组蛋白ESAT-6。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	谭云洪	湖南省结核病防治研究所检验科	24	146	8.0	11.0
2	袁仕善	湖南师范大学医学院分子生物学研究室	51	171	7.0	10.0
3	孙文霞	湖南师范大学医学院分子生物学研究室	10	49	3.0	6.0
4	王云	湖南师范大学医学院分子生物学研究室	2	2	1.0	1.0
5	杨双	湖南师范大学医学院分子生物学研究室	4	8	2.0	2.0
6	邓志高	湖南师范大学医学院分子生物学研究室	2	4	1.0	2.0