TcpC通过促进活性氧的产生诱导巨噬细胞凋亡

• 作者: 何非 张大勇 张翀 方洁 林仪茜 潘建平 王宝明
• 来源期刊: 浙江大学学报（医学版）
• 学科: 医学
• 关键词: 肠致病性大肠杆菌 巨噬细胞 活性氧 细胞凋亡 小鼠,基因敲除 细胞,培养的
• 年，卷（期）: 2013,（5）
• 所属期刊栏目: 专题报道
• 页码范围: 486-491,537
• 页数: 7页
• 分类号: R742.1
• 字数: 4180字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3785/j.issn.1008-9292.2013.05.002

摘要

目的:研究含有Toll/interleukin 1 receptor结构域的蛋白(TcpC)对巨噬细胞凋亡的影响,探讨TcpC诱导巨噬细胞凋亡的分子机制.方法:通过Transwell将分泌TcpC的尿路致病大肠埃希菌CFT073野生株(TcpCwt)和敲除tcpc基因的CFT073突变株(TcpC mut)与小鼠巨噬细胞系J774A隔开共培养,Annexin V/PI双染法观察不同数量和不同处理时间的TcpCwt和TcpCmut对J774A细胞凋亡的影响;活性氧染色观察不同处理时间的TcpCwt和TcpCmut对J774A细胞内活性氧水平的影响,Annexin V/PI双染法观察不同浓度N-乙酰半胱氨酸清除活性氧后TcpCwt和TcpCmut对J774A细胞凋亡的影响,Western blot法检测0.1 mmol N-乙酰半胱氨酸处理前后与TcpCwt和TcpCmut共培养的J774A细胞内caspase-3表达.结果:与对照组和TepC mut组相比,TcpCwt在细菌数量为5 ×105和5×106以及处理时间为24 h和36 h时均可显著促进J774A凋亡(均P＜0.01).共培养24 h和36 h的TcpCwt组J774A细胞内活性氧水平显著高于对照组和TcpC mut组(均P＜0.01).0.1 mmol和1 mmol N-乙酰半胱氨酸处理可显著抑制TcpCwt对J774A细胞的促凋亡作用(均P＜0.01).TcpCwt处理可显著降低J774A细胞内总caspase-3表达,而N-乙酰半胱氨酸处理可抑制与TcpCwt共培养的J774A细胞内caspase-3裂解,提高总caspase-3表达水平.结论:TcpC可促进巨噬细胞内活性氧产生,进而介导巨噬细胞凋亡.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	方洁	浙江大学城市学院医学院	37	282	8.0	16.0
2	张大勇	浙江大学城市学院医学院	17	46	4.0	6.0
3	张翀	浙江大学城市学院医学院	34	139	5.0	10.0
4	潘建平	浙江大学城市学院医学院	32	150	8.0	11.0
5	王宝明	浙江大学城市学院医学院	3	7	2.0	2.0
6	林仪茜	浙江大学城市学院医学院	1	2	1.0	1.0
7	何非	浙江大学城市学院医学院	1	2	1.0	1.0