牛白介素32基因可变剪接体(IL-32γ)的分子克隆及功能验证

• 作者: 张军林 杨藩 王华岩 程祥 魏育蕾
• 来源期刊: 农业生物技术学报
• 关键词: 牛 白细胞介素32(IL-32) 分子克隆 巨噬细胞 肿瘤坏死因子(TNFα)
• 年，卷（期）: 2013,（1）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 38-46
• 页数: 9页
• 字数: 6248字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-7968.2013.01.005

摘要

牛白细胞介素32(interleukin-32,IL-32)基因是近年发现的一种新型功能基因,是一种炎症性细胞因子,其主要作用是诱导其他细胞因子和化学因子的产生,并在自身免疫性炎症性疾病中发挥重要作用,可促进细胞凋亡,从而抑制结核分支杆菌(Mycobacterium)等多种分支杆菌感染,提高动物机体抗病能力.本研究从秦川牛(Bos taurus)脾脏组织中分子克隆了牛IL-32β基因及其可变剪接体IL-32γ基因,经序列分析表明,该基因定位于牛25号染色体上,实验克隆的牛IL-32β基因与NCBI中已发表序列有5个碱基不同,通过蛋白二级序列比较,该差异并不影响蛋白的折叠,推测这几个碱基差异是秦川黄牛IL32基因的SNP.IL-32γ比IL-32β序列多了第二内含子,导致编码序列多编码47个氨基酸.为了研究该可变剪接体的功能,本研究构建了真核表达载体pIRES-IL32γ-GFP.将该载体稳定转染小鼠(Mus musculus)巨噬细胞RAW264.7,获得超表达牛IL-32γ基因的小鼠巨噬细胞,同时以稳定转染人IL-32γ基因的小鼠巨噬细胞为阳性对照,Real-time PCR检测表明,超表达牛IL-32γ具有调节IL-1β、IL-6、MIP2、TNFα等细胞因子的功能,其趋势与阳性对照人IL-32γ的趋势相近.本实验研究为进一步研究牛IL-32γ基因生物学功能打下了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张军林	西北农林科技大学动物医学院	11	173	7.0	11.0
2	魏育蕾	西北农林科技大学动物医学院	3	7	1.0	2.0
3	程祥	西北农林科技大学动物医学院	2	2	1.0	1.0
4	杨藩	西北农林科技大学动物医学院	4	10	2.0	3.0
5	王华岩	西北农林科技大学动物医学院	21	67	5.0	7.0