慢病毒载体介导的RNAi双敲除ABCG2和UGT1A1的Caco-2细胞模型

• 作者: 吴志敏 张斌 朱泽 李光明 程彬 董莉真 龚淑敏
• 来源期刊: 天津医科大学学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 慢病毒载体 ABCG2 UGT1A1 Caco-2细胞 RNAi
• 年，卷（期）: 2013,（4）
• 所属期刊栏目: 基础医学
• 页码范围: 267-270,278
• 页数: 5页
• 分类号: Q7
• 字数: 3425字
• 语种: 中文

摘要

目的:构建以Caco-2细胞为研究对象,由慢病毒载体介导ABCG2和UGT1A1基因RNAi干扰的肠道药物吸收和代谢模型.方法:应用慢病毒载体介导的RNAi技术敲除Caco-2细胞的ABCG2和UGT1A1基因,构建双RNAi干扰ABCG2和UGT1A1的Caco-2细胞系.应用RT-PCR,Real-time PCR,Western blotting等方法检测ABCG2和UGT1A1在mRNA及蛋白水平的表达.然后选择干扰高表达细胞株,连续传代监测干扰相应干扰基因的表达变化.结果:成功构建了慢病毒载体介导的RNAi双干扰Caco-2细胞模型,慢病毒ABCG2和UGT1A1单基因干扰效率分别为75％和88％；分组先RNAiABCG2后RNAiUGT1A1的双基因RNAi干扰效率分别为72.3％和85.7％；分组先RNAi UGT1A1后RNAi ABCG2的双基因干扰效率分别为69.7％和88.7％; ABCG2与UGT1A1基因的RNAi干扰先后顺序与最终双干扰效果无显著性差异(P＞0.05).Western blotting方法验证ABCG2与UGT1A1的蛋白水平表达也分别相应地明显减少.结论:第一次应用慢病毒载体在Caco-2细胞上同时干扰ABCG2和UGT1A1基因表达.为研究肠道中ABCG2和UGT1A1对口服药物或外源化合物吸收和代谢的联合作用提供可靠细胞模型.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张斌	天津医科大学病原生物学教研室	39	222	7.0	13.0
2	朱泽	天津医科大学病原生物学教研室	21	113	6.0	10.0
3	李光明	天津医科大学病原生物学教研室	23	67	4.0	7.0
4	吴志敏	天津医科大学病原生物学教研室	4	16	2.0	4.0
5	董莉真	天津医科大学病原生物学教研室	3	15	2.0	3.0
6	程彬	天津医科大学病原生物学教研室	3	9	2.0	3.0
7	龚淑敏	天津市第四医院内科	1	2	1.0	1.0