靶基因Bi-1RNAi重组慢病毒载体的构建与鉴定

• 作者: 周克元 张美红 李祥勇 林观平
• 来源期刊: 广东医科大学学报
• 关键词: Bi-1 基因沉默 RNAi 慢病毒载体
• 年，卷（期）: 2010,（5）
• 页码范围: 489-492
• 分类号: R739.63
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1005-4057.2010.05.001

摘要

目的 构建靶向人Bax Inhibitor-1(Bi-1)基因的shRNA慢病毒重组载体.方法 借助siRNA设计工具,并结合文献资料选取Bi-1基因编码序列中有效的干扰靶点,根据连接载体中的酶切位点自行设计并人工合成干扰靶点的一对反义脱氧寡核苷酸链,先定向克隆到pU6载体(pU6-Bi-1-shRNA),再经双酶切后克隆到慢病毒包装质粒LunIG,得到靶向Bi-1基因沉默的慢病毒包装重组质粒LunIG-Bi-1.重组质粒经PCR法进行初筛后,再通过双酶切电泳和目的 基因沉默效果的检测保证插入序列的正确性.结果 靶向沉默Bi-1基因的shRNA序列成功插入到慢病毒包装质粒LunIG中.结论 靶向Bi-1基因沉默的慢病毒shRNA包装重组质粒构建成功.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	周克元	广东医学院生物化学与分子生物学研究所	210	1945	22.0	36.0
2	李祥勇	广东医学院生物化学与分子生物学研究所	24	113	6.0	9.0
3	林观平	广东医学院生物化学与分子生物学研究所	20	137	7.0	11.0
4	张美红	广东医学院生物化学与分子生物学研究所	4	7	1.0	2.0