动物源性肠出血性大肠杆菌O157∶H7及其3个毒力基因的多重PCR快速检测研究

• 作者: 刘中原 张莉娟 张龙现 王亚宾 申果 胡慧 陈丽颖 陈雅君
• 来源期刊: 中国人兽共患病学报
• 学科: 农学
• 关键词: 动物源性 肠出血性大肠杆菌O157∶H7 毒力基因 多重PCR
• 年，卷（期）: 2013,（7）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 686-691
• 页数: 6页
• 分类号: S855.1
• 字数: 4812字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/cjz.j.issn.1002-2694.2013.07.009

摘要

目的 建立快速、特异的分离鉴定大肠杆菌O157∶H7及其3个主要毒力基因(hylA、eaeA和stx2基因)的多重PCR方法.方法 根据GenBank公布的大肠杆菌O157∶H7菌体抗原rfbE基因、鞭毛抗原fliC基因、溶血素(hlyA)基因、紧密黏附素(eaeA)基因和志贺样毒素2(stx2)基因为靶基因,设计5对特异性引物,在同一扩增体系中进行PCR,优化反应体系,测定特异性和灵敏度,并进行了临床样品的检测.结果 该方法扩增目的基因片段分别为327 bp、247 bp、494 bp、384bp和779 bp,特异性和灵敏度均高,细菌纯培养物的检测灵敏度为104 cfu/mL.结论 初步建立了快速、灵敏、特异的检测肠出血性大肠杆菌O157∶H7及其3个毒力基因的多重PCR方法,可用于临床动物携带大肠杆菌O157∶H7的分子流行病学调查及食品微生物检测.