黄病毒属病毒RT-heminested-PCR方法的建立并用于蚊虫检测

• 作者: 党晨珀 周正斌 张仪 朱淮民
• 来源期刊: 中国人兽共患病学报
• 学科: 医学
• 关键词: RT-heminested PCR 蚊虫 黄病毒属病毒
• 年，卷（期）: 2013,（7）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 653-658
• 页数: 6页
• 分类号: R348.11
• 字数: 5304字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/cjz.j.issn.1002-2694.2013.07.003

摘要

目的 建立适合检测蚊虫携带黄病毒属病毒通用引物反转录半巢式PCR(RT-heminested-PCR)方法.方法 根据GenBank黄病毒属病毒非结构蛋白基因(nonstructuralproteins gene) NS5序列,在保守区设计2对(3条)黄病毒属病毒通用引物,以日本脑炎病毒(Japanese encephalitis virus,JEV) cDNA、登革病毒(Dengue virus,DENV)Ⅰ～Ⅳ型cDNA为模板优化条件建立RT-heminested-PCR方法；以日本脑炎病毒减毒活疫苗(SA14-14-2 strain)测定该方法的敏感度,并用于野外采集蚊虫检测.结果 在50只淡色库蚊中RT-heminested-PCR方法检测减毒活疫苗JEV最低检出浓度为1×10-2 PFU/mL.用该方法检测云南省普洱市采集的54组(540只)蚊虫,扩增产物经测序确认9组含有乙型脑炎病毒、3组含有登革病毒Ⅱ型、1组合有登革病毒Ⅰ型、1组含未报道的黄病毒属病毒,该病毒与Quang Binh virus同源性最高.结论 黄病毒属病毒通用引物RT-heminested PCR方法适合于蚊虫种群黄病毒属病毒监测.其不但适应已知黄病毒属病毒的检测,而且具备检测新型黄病毒属病毒的潜能.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	朱淮民	第二军医大学病原生物教研室	55	261	9.0	12.0
2	党晨珀	第二军医大学病原生物教研室	4	9	2.0	3.0