茄病镰刀菌ALP小干扰RNA载体的构建与表达

• 作者: 何宏 刘珂凤 喻文倩 梁涛 王婷 赵桂秋
• 来源期刊: 预防医学论坛
• 学科: 医学
• 关键词: 茄病镰刀菌 真菌性角膜炎 丝氨酸蛋白酶 RNA干扰
• 年，卷（期）: 2013,（4）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 286-288
• 页数: 3页
• 分类号: R379
• 语种: 中文

摘要

[目的]进一步研究碱性丝氨酸蛋白酶(ALP)在真菌性角膜炎发病机制中的作用,寻找有效的治疗措施.[方法]根据载体质粒pBC-hygro要求设计两对小干扰RNA,退火后连接于载体相应位点,经双酶切及测序鉴定后,分别转染标准茄病镰刀菌株,得到菌株△ALP1和△ALP2.采用蛋白琼脂廓清特殊培养基检测酶活性变化,Western-blot检测ALP的表达,并与标准茄病镰孢菌比较.[结果]检测△ALP1菌株、△ALP2菌株和对照菌株各6份,其CH值标准株为0.80±0.01,△ALP1为0.80±0.03,△ALP2为0.86±0.03,△ALP1与标准株的差异无统计学意义(P＞0.05),△ALP2大于标准菌和△ALP1株(P＜0.01).ALP蛋白条带的积分值(INT×mm2),标准株为1 240.29±289.77,△ALP1为603.58±120.55,△ALP2为401.84±117.94,△ALP1与△ALP2均低于标准株(P＜0.01),△ALP1高于△ALP2(P＜0.05).[结论]成功地构建了ALP小干扰RNA载体及稳定转染菌株.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	赵桂秋	青岛大学医学院附属医院	177	834	14.0	20.0
2	梁涛	青岛大学医学院附属医院	35	121	6.0	9.0
3	何宏	青岛大学医学院附属医院	48	274	8.0	15.0
4	王婷	青岛大学医学院附属医院	24	51	4.0	6.0
5	刘珂凤	青岛大学医学院附属医院	3	3	1.0	1.0
6	喻文倩	青岛大学医学院附属医院	3	3	1.0	1.0